中国林蛙的经济价值主要体现在雌蛙的输卵管,雌蛙输卵管的风干品,即哈士蟆油,是一种珍贵的滋补品,有“软黄金”之称。在南方,由于繁殖季节温度相对偏高,会导致中国林蛙胚胎的生殖腺向雄性方向分化,导致雄性比例偏高,因此中国林蛙南方养殖的雌性化问题就显得更加关键。
1.原理 中国林蛙在胚胎发育初期性腺并没有分化,当胚胎发育到一定阶段,其原生殖细胞向雌性和雄性两个方向分化。中国林蛙胚胎的生殖腺由皮质、髓质和原生殖细胞三个主要部分组成。如果原生殖细胞进入生殖腺皮质部分,生殖腺向雌性方向分化;如果原生殖细胞进入生殖腺髓质部分,生殖腺则向雄性方向分化。在性腺分化的关键时期,通过激素诱导或改变环境温度,均可促使其生殖腺向某一性别方向发育,并永久保持这一性别特征,而且不影响繁育后代。笔者在实验中发现,在一定时期施加一定浓度的激素可以提高雌性中国林蛙的比例,一般可以达到70%~85%。在变态初期对幼蛙进行比较发现,施加性激素的中国林蛙明显比没有加性激素的中国林蛙强壮。2.雌性诱变方法 目前中国林蛙雌性诱变的方法主要有两种,一种是控温法,另一种是性激素诱导法。其中控温法比较安全,经济实惠,但是不易操作,雌性诱变率不稳定。与控温法相比,激素诱导法比较容易操作,雌性诱变率又比较稳定,但是从长远考虑,激素诱导法对中国林蛙的品质可能会造成影响。(1)控温法:即通过控制蝌蚪养殖期的水温来调节中国林蛙雌性个体的比例。在中国林蛙生殖腺分化期间,温度对生殖腺的分化发育的方向有明显影响。温度高,生殖腺向雄性分化发育的比例比较高;温度低,生殖腺向雌性分化发育的比例较高。在蝌蚪生长发育期间,特别是在缓慢生长期和变态期,将日最高水温控制在13~18℃,即可诱导生殖腺向雌性方向分化,达到提高雌性个体比例的目的,一般雌性个体可达70%左右。控温法有以下几种:①调节水位和光照:调节水位和光照是控温的有效手段,可以采取遮光、提高水位等措施来降低水温以达到控温要求。通过这种方法可以将水温控制在高于日最低气温3~4℃的水平。②调节产卵时间:通过人工催产来改变中国林蛙产卵时机,让中国林蛙提前产卵,具体产卵时间可以根据当地的气候条件而定。在江南一带,一般4月上旬以前水温很少超过20℃,因此可以通过人工调控,让中国林蛙2月份产卵,3~4月份变态,以充分利用自然的温度条件进行雌性诱导。③用深井水降温:在蝌蚪期进行性诱变时,如水温超过20℃,有条件的可利用深井水来降温。白天水温高时不断加入井水并排出池水,即可达到降温的目的。利用井水时,最好事先对井水进行检测,以确保蝌蚪安全。(2)激素诱导法:即利用雌性激素来诱导中国林蛙的生殖腺向雌性方向分化发育。雌性激素属于固醇类激素,不溶于水,因此用药时要用酒精来溶解。另外激素的作用效力很高,在用药时一定要注意用药量,用药量过大会导致中国林蛙发育畸形。①用药时机:在中国林蛙的卵团胚胎发育至尾芽期生长过程中开始用药。②药物:雌性激素类药物种类很多,有雌二醇、雌三醇、雌酚片、雌烯酚、孕酮等多种,其中每一种又包括多种结构不同的成分,如雌二醇就有苯甲酸雌二醇、戊酸雌二醇、β-雌二醇等多种。因此在选择雌性诱变剂时要科学合理,并非只要是雌性激素就可以使用。另外,近年来笔者在研究中发现,几种雌性激素类药物合理配比使用效果最佳。③给药方式药饵:尾芽期用药后,到了蝌蚪取食期,也可将激素混拌到饵料中投喂。在制作药饵时,要将药物和饵料充分混合。另外要注意用药量,过多会导致发育畸形,药量不够则起不到诱变的效果。水体给药:即将药物溶解后直接喷洒到养殖池中。水体给药法的吸收效果不如药饵好,但是这种给药方法药效持续时间相对要长一些。